發(fā)布時(shí)間:2005-04-21
來源:中國食用菌商務(wù)網(wǎng)
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食用菌產(chǎn)品中總糖含量的測定方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于黑木耳、銀耳和茯苓三類食用菌中總糖的測定。本標(biāo)準(zhǔn)不適用于蛋白質(zhì)含量高的其他菇類(蘑菇、香菇、平菇等)中總糖含量的測定。
2 引用標(biāo)準(zhǔn)
GB 12530 食用菌取樣方法
GB 12531 食用菌含水量測定
3 方法提要或原理
黑木耳、 銀耳和茯苓中水溶性糖和水不溶性多糖經(jīng)熱稀鹽酸徹底水解后轉(zhuǎn)化成還原糖,還原糖可用費(fèi)林氏容量法定量,以此計(jì)算出樣品中總糖含量。
4 試劑
分析中,除另有說明,均限用分析純?cè)噭⒄麴s水或相當(dāng)純度的水。
4.1 氫氧化鈉(GB 629)。
4.2 濃鹽酸(GB 622):密度1.18g/mL。
4.3 氫氧化鈉(GB 629)溶液:6mol/L。
4.4 費(fèi)林氏試劑
4.4.1 A液:溶解69.28g五水合硫酸銅(GB 665,CuSO4·5H2O)于水中,定容至1000mL,過濾后備用。
4.4.2 B液:溶解346g酒石酸鉀鈉(GB 1288,NaKC4H4O6·4H2O)和100g氫氧化鈉(4.1)于水中,定容至1000mL,過濾后備用。
4.5 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液:精確稱取烘干的葡萄糖1.0000g,精確到0.0001g,用水溶解,加入5mL濃鹽酸(4.2),再以水配制成10g/L濃度溶液定容至1000mL,成為1g/L濃度溶液。
4.6 次甲基藍(lán)(HG B33 94)指示液:10g/L。
5 儀器、設(shè)備
5.1 電熱鼓風(fēng)干燥箱。
5.2 小型植物粉碎機(jī):備有1mm孔徑的金屬篩網(wǎng)。
5.3 玻璃研缽:備有研杵。
5.4 分樣篩:備有孔徑0.84mm(20目)篩子。
5.5 分析天平:感量0.0001g。
5.6 電熱水浴鍋。
5.7 廣口瓶:帶磨口。
5.8 濾紙:直徑15cm。
5.9 玻璃三角漏斗:直徑75mm。
5.10 圓底燒瓶:250mL,上部插有作回流用的30cm長玻璃管。
5.11 容量瓶:250、1000mL。
5.12 量筒:100mL。
5.13 燒杯:25、500mL。
5.14 錐形瓶:250mL。
5.15 移液管:5、10、20mL。
5.16 酸式滴定管:50mL。
5.17 稱量瓶。
5.18 廣范pH紙。
5.19 可調(diào)電爐:0~600W,附石棉網(wǎng)。
5.20 玻棒和滴管。
6 樣品
6.1 取樣方法和數(shù)量
6.1.1 干制品按GB 12530中規(guī)定要求進(jìn)行??偭坎坏蒙儆?/span>100g。
6.1.2 鮮耳和鮮茯苓在每批不同的地方隨機(jī)取樣作為原始樣品,總量不得少于1000g。
6.2 試樣的制備
6.2.1 干品直接用剪刀剪成小塊,在80~100℃干燥箱中烘至發(fā)脆后冷卻,立即用小型植物粉碎機(jī)粉碎。棄去開始粉碎出的樣品(約占總樣十分之一)。粉碎過的樣品需過20目篩。未能過篩部分經(jīng)烘干之后再次粉碎或經(jīng)缽內(nèi)研磨之后再次過篩,直至全部樣品過篩為止。過篩后的樣品裝入清潔的廣口瓶內(nèi)。樣品密封后填寫標(biāo)簽,注明品名、日期、交樣單位和取樣人等。
6.2.2 鮮耳取樣后用手撕成小塊,鮮茯苓則需去皮后用小刀切成小塊。樣品均勻地?cái)傇诟稍锵鋬?nèi)墊有紗布的鐵絲網(wǎng)上,50℃鼓風(fēng)干燥6h以上,待樣品半干后再逐步提高溫度至80~100℃。樣品發(fā)脆之后冷卻,立即用粉碎機(jī)粉碎。其他操作同干品。
7 分析步驟
7.1 稱樣和水解:稱取約0.25g試樣,精確到0.0001g,小心地倒入圓底燒瓶中,加100mL水和10mL濃鹽酸(4.2)。燒瓶瓶口插上回流用的玻璃管,置100℃沸水浴上水解3h。冷卻后過濾。濾渣用100mL水無損地洗回到圓底燒瓶中(用滴管小心地操作),再加酸10mL,重復(fù)上述操作。合并兩次過濾液,用6mol/L氫氧化鈉溶液(4.3)調(diào)節(jié)pH至 中性(用pH紙測試),適當(dāng)加熱濃縮后定容至250mL。同時(shí),按GB 12531中規(guī)定的方 法稱樣并測定試樣的含水量。
7.2 費(fèi)林氏液的標(biāo)定:準(zhǔn)確吸取費(fèi)林氏A液(4.4.1)和B液(4.4.2)各5mL于 250mL錐形瓶中,混勻,加玻璃珠數(shù)粒,置于石棉網(wǎng)上加熱。快速從滴定管中放入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(4.5)49mL,調(diào)節(jié)溫度,使之在2min內(nèi)沸騰,保持微沸2min,期間加入次甲基 藍(lán)指示液(4.6)3滴;隨后逐滴加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,直至藍(lán)色褪盡。滴定過程須在3min總沸騰時(shí)間內(nèi)完成。10mL費(fèi)林氏混合液需耗葡萄 糖標(biāo)準(zhǔn)溶液50mL左右。該滴定值為所配制的費(fèi)林試劑標(biāo)定值。在大批樣品測定時(shí),可將A、B液等體積混合后標(biāo)定和使用,混合液保存不宜超過一個(gè)月。
7.3 試樣液的滴定:250mL錐形瓶中加入費(fèi)林A、B液各5mL,混勻,再加入試樣液10~20mL,加玻璃珠數(shù)粒,置于石棉網(wǎng)上加熱。在正式滴定前, 應(yīng)先用一份試樣進(jìn) 行粗滴定,一邊加熱一邊逐滴加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液,確定出試樣液大致耗糖體積。正式滴定時(shí),錐形瓶加熱后應(yīng)快速從滴定管中放出比實(shí)際少1mL左右的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液,其他操作同費(fèi)林氏液的標(biāo)定。
8 分析結(jié)果的計(jì)算
8.1 計(jì)算
總糖(干基,以葡萄糖計(jì),%)=〔(V0-V1)×0.001×250〕/V2×m×(1-X)〕×100
式中:V0── 10mL費(fèi)林氏混合液耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的體積,mL;
V1── 試樣液滴定時(shí)耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的體積,mL;
V2── 試樣液吸取體積,mL;
m── 試樣的質(zhì)量,g;
0.001── 1mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液中葡萄糖質(zhì)量,g;
250── 兩次水解液合并后定容的體積,mL;
X── 樣品含水量,%。
8.2 允許差
取平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值作為測定結(jié)果,保留小數(shù)后一位。
平行測定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于1.0%。
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