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食用菌總糖含量測定方法
1 主題內容與適用范圍
本標準規定了食用菌產品中總糖含量的測定方法。
本標準適用于黑木耳、銀耳和茯苓三類食用菌中總糖的測定。本標準不適用于蛋白質含量高的其他菇類（蘑菇、香菇、平菇等）中總糖含量的測定。

2 引用標準
GB 12530 食用菌取樣方法
GB 12531 食用菌含水量測定
3 方法提要或原理
黑木耳、銀耳和茯苓中水溶性糖和水不溶性多糖經熱稀鹽酸徹底水解后轉化成還原糖，還原糖可用費林氏容量法定量，以此計算出樣品中總糖含量。

4 試劑
分析中，除另有說明，均限用分析純試劑、蒸餾水或相當純度的水。
4.1 氫氧化鈉（GB 629）。
4.2 濃鹽酸（GB 622）：密度1.18g/mL。
4.3 氫氧化鈉（GB 629）溶液：6mol/L。 
4.4 費林氏試劑
4.4.1 A液：溶解69.28g五水合硫酸銅（GB 665，CuSO4·5H2O）于水中，定容至1000mL，過濾后備用。
4.4.2 B液：溶解346g酒石酸鉀鈉（GB 1288，NaKC4H4O6·4H2O）和100g氫氧化鈉（4.1）于水中，定容至1000mL，過濾后備用。
4.5 葡萄糖標準溶液：精確稱取烘干的葡萄糖1.0000g，精確到0.0001g，用水溶解，加入5mL濃鹽酸（4.2），再以水配制成10g/L濃度溶液定容至1000mL，成為1g/L濃度溶液。 4.6 次甲基藍（HG B33 94）指示液：10g/L。 
5 儀器、設備 
5.1 電熱鼓風干燥箱。 
5.2 小型植物粉碎機：備有1mm孔徑的金屬篩網。
5.4 分樣篩：備有孔徑0.84mm（20目）篩子。 
5.5 分析天平：感量0.0001g。
5.6 電熱水浴鍋。 
5.7 廣口瓶：帶磨口。
5.8 濾紙：直徑15cm。
5.9 玻璃三角漏斗：直徑75mm。
5.10 圓底燒瓶：250mL，上部插有作回流用的30cm長玻璃管。
5.11 容量瓶：250、1000mL。
5.12 量筒：100mL。
5.13 燒杯：25、500mL。
5.14 錐形瓶：250mL。 
5.15 移液管：5、10、20mL。
5.16 酸式滴定管：50mL。
5.17 稱量瓶。
5.18 廣范pH紙。
5.19 可調電爐：0～600W，附石棉網。
5.20 玻棒和滴管。 
6 樣品
6.1 取樣方法和數量 
6.1.1 干制品按GB 12530中規定要求進行。總量不得少于100g。
6.1.2 鮮耳和鮮茯苓在每批不同的地方隨機取樣作為原始樣品，總量不得少于1000g。
6.2 試樣的制備 
6.2.1 干品直接用剪刀剪成小塊，在80～100℃干燥箱中烘至發脆后冷卻，立即用小型植物粉碎機粉碎。棄去開始粉碎出的樣品（約占總樣十分之一）。粉碎過的樣品需過20目篩。未能過篩部分經烘干之后再次粉碎或經缽內研磨之后再次過篩，直至全部樣品過篩為止。過篩后的樣品裝入清潔的廣口瓶內。樣品密封后填寫標簽，注明品名、日期、交樣單位和取樣人等。

 6.2.2  鮮耳取樣后用手撕成小塊，鮮茯苓則需去皮后用小刀切成小塊。樣品均勻地攤在干燥箱內墊有紗布的鐵絲網上，50℃鼓風干燥6h以上，待樣品半干后再逐步提高溫度至80～100℃。樣品發脆之后冷卻，立即用粉碎機粉碎。其他操作同干品。
7 分析步驟 
7.1 稱樣和水解：稱取約0.25g試樣，精確到0.0001g，小心地倒入圓底燒瓶中，加100mL水和10mL濃鹽酸（4.2）。燒瓶瓶口插上回流用的玻璃管，置100℃沸水浴上水解3h。冷卻后過濾。濾渣用100mL水無損地洗回到圓底燒瓶中（用滴管小心地操作），再加酸10mL，重復上述操作。合并兩次過濾液，用6mol/L氫氧化鈉溶液（4.3）調節pH至中性（用pH紙測試），適當加熱濃縮后定容至250mL。同時，按GB 12531中規定的方法稱樣并測定試樣的含水量。 
7.2 費林氏液的標定：準確吸取費林氏A液（4.4.1）和B液（4.4.2）各5mL于  250mL錐形瓶中，混勻，加玻璃珠數粒，置于石棉網上加熱。快速從滴定管中放入葡萄糖標準溶液（4.5）49mL，調節溫度，使之在2min內沸騰，保持微沸2min，期間加入次甲基藍指示液（4.6）3滴；隨后逐滴加入葡萄糖標準溶液，直至藍色褪盡。滴定過程須在3min總沸騰時間內完成。10mL費林氏混合液需耗葡萄糖標準溶液50mL左右。該滴定值為所配制的費林試劑標定值。在大批樣品測定時，可將A、B液等體積混合后標定和使用，混合液保存不宜超過一個月。

7.3 試樣液的滴定：250mL錐形瓶中加入費林A、B液各5mL，混勻，再加入試樣液10～20mL，加玻璃珠數粒，置于石棉網上加熱。在正式滴定前應先用一份試樣進  行粗滴定，一邊加熱一邊逐滴加入葡萄糖標準液，確定出試樣液大致耗糖體積。正式滴定時，錐形瓶加熱后應快速從滴定管中放出比實際少1mL左右的葡萄糖標準液，其他操作同費林氏液的標定。

8 分析結果的計算
8.1 計算 總糖（干基，以葡萄糖計，％）=〔（V0-V1）×0.001×250]/V2×m×（1-X）〕×100 
式中：V0── 10mL費林氏混合液耗葡萄糖標準液的體積，mL；  
            V1── 試樣液滴定時耗葡萄糖標準液的體積，mL；  
            V2── 試樣液吸取體積，mL；  m── 試樣的質量，g；  0.001── 1mL葡萄糖標準液中葡萄糖質量，g；  250── 兩次水解液合并后定容的體積，mL；  X── 樣品含水量，％。  
8.2 允許差
取平行測定結果的算術平均值作為測定結果，保留小數后一位。
平行測定結果的絕對差值不大于1.0％。

編輯：黑子