食用菌無菌操作
記得20多年前剛上班時(shí)，一個(gè)干食用菌工作已經(jīng)多年的老師傅向我們小青年展示擴(kuò)繁母種技術(shù)，在擴(kuò)繁過程中，我注意到這位老師燒完接種針后，不住的將針往手背上飛快地點(diǎn)一下、點(diǎn)一下，我當(dāng)時(shí)很奇怪，這位老師回答，這是在試一下接種針是否已經(jīng)冷卻，否則直接轉(zhuǎn)擴(kuò)母種，可能會(huì)導(dǎo)致菌種燙死。我當(dāng)時(shí)懷疑，咱們手上都有雜菌，這樣做不就又把接種針污染了，老師傅回答說，沒有事，手已經(jīng)用酒精消毒了，不會(huì)有雜菌的。現(xiàn)在這個(gè)做法對(duì)錯(cuò)與否，相信很多朋友一目了然，酒精消毒，只是相對(duì)殺滅部分雜菌，但是做到完全無菌是不可能的，所以母種出現(xiàn)大量的雜菌感染也就可以理解了。
還有一個(gè)搞微生物的好朋友，轉(zhuǎn)擴(kuò)母種時(shí)，總有雜菌污染，無奈之下有求于我，我詳細(xì)觀察了他的接種細(xì)節(jié)，發(fā)現(xiàn)他在燒完接種鉤后，為了冷卻徹底，習(xí)慣性的用酒精棉球擦拭一下，就是這個(gè)環(huán)節(jié)導(dǎo)致接種失敗。
以上兩例失敗的原因在于對(duì)無菌操作的概念理解不深，沒有將無菌操作的理念與生產(chǎn)環(huán)節(jié)完美結(jié)合，所以出現(xiàn)失誤就在所難免了。
筆者認(rèn)為，作為一個(gè)食用菌職業(yè)工作者，必須正確理解無菌操作，在生產(chǎn)中的各個(gè)環(huán)節(jié)，每一個(gè)環(huán)節(jié)都要嚴(yán)格按照無菌操作的要求去做，才能保證最后的高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)。下面簡(jiǎn)要說明一下我理解的無菌操作理念，以供各位參考。
1. 培養(yǎng)基滅菌，有常壓滅菌及高壓滅菌，如何做到讓培養(yǎng)基完全無菌，已經(jīng)是很成熟很普及的技術(shù)，這里我看就不必多言了；
2.正確了解“無塵即無菌”。日常條件下，消毒滅菌好的培養(yǎng)基不能開放接種，就是因?yàn)槲醇犹幚淼目諝庵写嬖诖罅康幕覊m，大量的雜菌孢子及休眠體是附著在灰塵中飛來飛去的，所以將接種區(qū)空氣中的灰塵完全除掉，也就是完全去除雜菌的過程。工廠化接種車間，層流罩接種凈化區(qū)，超凈臺(tái)接種區(qū)等，都是履行除塵程序，獲得潔凈空氣的典范。
這里要求，不是在接種時(shí)才考慮除塵，在將培養(yǎng)基從滅菌鍋取出等待冷卻的過程中，就要講究無塵，很多大規(guī)模生產(chǎn)基地和工廠化菇場(chǎng)的培養(yǎng)基冷卻車間就已經(jīng)基本做到了無塵化處理。你想想，如果你的培養(yǎng)袋在冷卻過程中，沾滿灰塵，就是空氣再干凈，那么在接種過程中也很容易導(dǎo)致灰塵進(jìn)入，大量的雜菌污染也就很有可能了。
在實(shí)際生產(chǎn)中，如何做到無塵化的方法很多，小規(guī)模種植戶的接種室可以用噴霧的方法來降塵除塵，檢查除塵效果的簡(jiǎn)易方法，可以用一個(gè)手電筒在黑暗條件下照射，有無灰塵會(huì)一目了然。當(dāng)然在簡(jiǎn)易條件下，單純做到空氣除塵還是不夠的，還要結(jié)合殺滅雜菌的方法保證接種質(zhì)量；
3.除塵除菌和消毒殺菌相結(jié)合。分散的小規(guī)模種植戶在設(shè)備條件上較差，很難做到系統(tǒng)化的除塵除菌技術(shù)，那么就需要土洋結(jié)合了。生產(chǎn)中廣泛使用的接種箱、接種帳、接種室等，空氣滅菌用的紫外線燈、臭氧機(jī)、離子風(fēng)機(jī)等，氣霧消毒劑、煙霧消毒劑等就是根據(jù)這個(gè)條件而使用的。在這里要了解一點(diǎn)，單純用殺菌劑滅菌，也不是100%將雜菌殺滅的，更要注意各個(gè)環(huán)節(jié)的無菌操作緊密結(jié)合；
4.要充分利用“灼燒滅菌”的完全滅菌優(yōu)勢(shì)。在所有的潔凈技術(shù)中，灼燒滅菌是能夠做到完全滅菌的，我們?cè)诮臃N過程中，點(diǎn)燃酒精燈，灼燒接種針，那么接種針頭部經(jīng)過灼燒后，就是完全無菌的，酒精燈火焰周圍的一小塊區(qū)域也是完全無菌的，就是有灰塵，也是無菌灰塵。根據(jù)這個(gè)原理，那么我們?cè)诮臃N時(shí)（例如接原種）可以這樣做，不必用接種箱，也不必用超凈臺(tái)，任何藥劑都不用，只需一個(gè)液化氣爐子即可，空間空氣不要流動(dòng)，點(diǎn)燃液化氣爐，那么液化氣爐盤上方的區(qū)域就是無菌區(qū)域，接種人員帶上口罩，在這個(gè)區(qū)域即可輕松接種。我們的一個(gè)學(xué)員采用該方法接原種近5000瓶，無一污染，質(zhì)量是相當(dāng)高，當(dāng)然在夏天接種有點(diǎn)熱，可以開空調(diào)降降溫；
5.各個(gè)生產(chǎn)細(xì)節(jié)更要充分注意無菌操作。以轉(zhuǎn)擴(kuò)母種為例，推薦使用超凈臺(tái)，接種針要用酒精燈灼燒，母種試管口及培養(yǎng)基試管口都要灼燒，因?yàn)槲覀冊(cè)诎蜗旅奕蚬枘z塞時(shí)，手上的雜菌肯定會(huì)沾到試管口，在轉(zhuǎn)擴(kuò)時(shí)如果針碰到別的物品，應(yīng)該重新灼燒，不能遷就，當(dāng)然我們的手還是要用酒精棉球等徹底清洗的。有的地方在接種栽培種時(shí)，喜歡用殺菌劑兌好的滅菌水浸泡原種瓶，認(rèn)為這樣能充分滅菌，實(shí)際上多此一舉，反而有副作用，不如用酒精棉球擦拭一遍消毒更徹底。如此細(xì)節(jié)，不勝枚舉；
6.出菇環(huán)節(jié)的無菌處理。在出菇期，筆者認(rèn)為無菌操作的執(zhí)行更是很有必要，比如在預(yù)防平菇、金針菇黃斑病的管理細(xì)節(jié)中，我們提到定期每隔6-7天噴灑治療細(xì)菌性斑點(diǎn)病的殺菌劑，可以做到整個(gè)出菇過程基本不發(fā)生黃菇病，效果很好；在出菇完畢，將出菇袋徹底清除，出菇棚徹底消毒等等，這些都是無菌操作與食用菌生產(chǎn)完美結(jié)合的具體表現(xiàn)。
無菌操作的理念不能根據(jù)上面我寫的一概而論，更多的要在實(shí)際生產(chǎn)中隨時(shí)創(chuàng)新，以上純屬閑談性質(zhì)，歡迎廣大朋友討論。 （孫慶溫 山東壽光食用菌研究所）
（特別聲明：以上文章內(nèi)容僅代表作者本人觀點(diǎn)，不代表本網(wǎng)站觀點(diǎn)或立場(chǎng)。）
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