食用菌無菌操作
記得20多年前剛上班時，一個干食用菌工作已經多年的老師傅向我們小青年展示擴繁母種技術，在擴繁過程中，我注意到這位老師燒完接種針后，不住的將針往手背上飛快地點一下、點一下，我當時很奇怪，這位老師回答，這是在試一下接種針是否已經冷卻，否則直接轉擴母種，可能會導致菌種燙死。我當時懷疑，咱們手上都有雜菌，這樣做不就又把接種針污染了，老師傅回答說，沒有事，手已經用酒精消毒了，不會有雜菌的。現在這個做法對錯與否，相信很多朋友一目了然，酒精消毒，只是相對殺滅部分雜菌，但是做到完全無菌是不可能的，所以母種出現大量的雜菌感染也就可以理解了。
還有一個搞微生物的好朋友，轉擴母種時，總有雜菌污染，無奈之下有求于我，我詳細觀察了他的接種細節，發現他在燒完接種鉤后，為了冷卻徹底，習慣性的用酒精棉球擦拭一下，就是這個環節導致接種失敗。
以上兩例失敗的原因在于對無菌操作的概念理解不深，沒有將無菌操作的理念與生產環節完美結合，所以出現失誤就在所難免了。
筆者認為，作為一個食用菌職業工作者，必須正確理解無菌操作，在生產中的各個環節，每一個環節都要嚴格按照無菌操作的要求去做，才能保證最后的高產、穩產。下面簡要說明一下我理解的無菌操作理念，以供各位參考。
1. 培養基滅菌，有常壓滅菌及高壓滅菌，如何做到讓培養基完全無菌，已經是很成熟很普及的技術，這里我看就不必多言了；
2.正確了解“無塵即無菌”。日常條件下，消毒滅菌好的培養基不能開放接種，就是因為未加處理的空氣中存在大量的灰塵，大量的雜菌孢子及休眠體是附著在灰塵中飛來飛去的，所以將接種區空氣中的灰塵完全除掉，也就是完全去除雜菌的過程。工廠化接種車間，層流罩接種凈化區，超凈臺接種區等，都是履行除塵程序，獲得潔凈空氣的典范。
這里要求，不是在接種時才考慮除塵，在將培養基從滅菌鍋取出等待冷卻的過程中，就要講究無塵，很多大規模生產基地和工廠化菇場的培養基冷卻車間就已經基本做到了無塵化處理。你想想，如果你的培養袋在冷卻過程中，沾滿灰塵，就是空氣再干凈，那么在接種過程中也很容易導致灰塵進入，大量的雜菌污染也就很有可能了。
在實際生產中，如何做到無塵化的方法很多，小規模種植戶的接種室可以用噴霧的方法來降塵除塵，檢查除塵效果的簡易方法，可以用一個手電筒在黑暗條件下照射，有無灰塵會一目了然。當然在簡易條件下，單純做到空氣除塵還是不夠的，還要結合殺滅雜菌的方法保證接種質量；
3.除塵除菌和消毒殺菌相結合。分散的小規模種植戶在設備條件上較差，很難做到系統化的除塵除菌技術，那么就需要土洋結合了。生產中廣泛使用的接種箱、接種帳、接種室等，空氣滅菌用的紫外線燈、臭氧機、離子風機等，氣霧消毒劑、煙霧消毒劑等就是根據這個條件而使用的。在這里要了解一點，單純用殺菌劑滅菌，也不是100%將雜菌殺滅的，更要注意各個環節的無菌操作緊密結合；
4.要充分利用“灼燒滅菌”的完全滅菌優勢。在所有的潔凈技術中，灼燒滅菌是能夠做到完全滅菌的，我們在接種過程中，點燃酒精燈，灼燒接種針，那么接種針頭部經過灼燒后，就是完全無菌的，酒精燈火焰周圍的一小塊區域也是完全無菌的，就是有灰塵，也是無菌灰塵。根據這個原理，那么我們在接種時（例如接原種）可以這樣做，不必用接種箱，也不必用超凈臺，任何藥劑都不用，只需一個液化氣爐子即可，空間空氣不要流動，點燃液化氣爐，那么液化氣爐盤上方的區域就是無菌區域，接種人員帶上口罩，在這個區域即可輕松接種。我們的一個學員采用該方法接原種近5000瓶，無一污染，質量是相當高，當然在夏天接種有點熱，可以開空調降降溫；
5.各個生產細節更要充分注意無菌操作。以轉擴母種為例，推薦使用超凈臺，接種針要用酒精燈灼燒，母種試管口及培養基試管口都要灼燒，因為我們在拔下棉塞或硅膠塞時，手上的雜菌肯定會沾到試管口，在轉擴時如果針碰到別的物品，應該重新灼燒，不能遷就，當然我們的手還是要用酒精棉球等徹底清洗的。有的地方在接種栽培種時，喜歡用殺菌劑兌好的滅菌水浸泡原種瓶，認為這樣能充分滅菌，實際上多此一舉，反而有副作用，不如用酒精棉球擦拭一遍消毒更徹底。如此細節，不勝枚舉；
6.出菇環節的無菌處理。在出菇期，筆者認為無菌操作的執行更是很有必要，比如在預防平菇、金針菇黃斑病的管理細節中，我們提到定期每隔6-7天噴灑治療細菌性斑點病的殺菌劑，可以做到整個出菇過程基本不發生黃菇病，效果很好；在出菇完畢，將出菇袋徹底清除，出菇棚徹底消毒等等，這些都是無菌操作與食用菌生產完美結合的具體表現。
無菌操作的理念不能根據上面我寫的一概而論，更多的要在實際生產中隨時創新，以上純屬閑談性質，歡迎廣大朋友討論。 （孫慶溫 山東壽光食用菌研究所）
（特別聲明：以上文章內容僅代表作者本人觀點，不代表本網站觀點或立場。）
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